人**內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
貨號 KL-021
簡稱 HEC-1-B
細(xì)胞數(shù) 1×106
規(guī)格 1ml/T25
價格 詢價
注意事項：
1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細(xì)描述 Description
人**內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞是H. Kuramoto 1968年分離的HEC-1-A細(xì)胞亞株。不同于HEC-A-1的是：該亞株在培養(yǎng)第135天到190天之間表現(xiàn)出穩(wěn)定的生長周期，且重現(xiàn)扁平，與親本細(xì)胞系相比更具鋪路石式樣。此外主要染色體組是親本細(xì)胞的兩倍。
人**內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
細(xì)胞特性
來源：**內(nèi)膜腺癌
形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長
含量：>1x106 個/mL
污染：支原體、**、酵母和**檢測為陰性
規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
細(xì)胞接受后的處理：
收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞用途：僅供科研使用。
人**內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM， GIBCO，貨號41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)。
培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
細(xì)胞處理：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。**天換液并檢查細(xì)胞密度。
人**內(nèi)膜腺癌細(xì)胞細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，*后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至*終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
