Middlebrook 7H9 肉湯基礎(chǔ)
產(chǎn)品詳情
Middlebrook 7H9 肉湯基礎(chǔ)
Middlebrook 7H9 Broth Base
——用于分枝桿菌的培養(yǎng),每90ml添加0.2ml甘油、0.05g吐溫80和2支S1602
培養(yǎng)基配方:
Ammonium Sulfate(硫酸銨) 0.5g
L-Glutamic Acid(L-谷氨酸) 0.5g
Sodium Citrate(檸檬酸鈉) 0.1g
Pyridoxine(維生素B6) 1.0mg
Biotin(生物素) 0.5mg
Disodium Phosphate
(磷酸氫二鈉) 2.5g
Monopotassium Phosphate
(磷酸二氫鉀) 1.0g
Ferric Ammonium Citrate
(檸檬酸鐵銨) 0.04g
Magnesium Sulfate(硫酸鎂) 0.05g
Calcium Chloride(氯化鈣) 0.5mg
Zinc Sulfate(硫酸鋅) 1.0mg
Copper Sulfate(硫酸銅) 1.0mg
pH6.6±0.2(25℃)
使用方法:
稱取本品4.7g于900ml的蒸餾水或去離子水中(如需要,加入2ml甘油及0.5g吐溫-80),加熱煮沸溶解,分裝,121℃**10分鐘,冷卻至50℃左右,無菌操作每90ml培養(yǎng)基添加2支S1602(Middlebrook ADC增菌液),輕輕混勻,備用。
Middlebrook 7H9 肉湯基礎(chǔ)使用方法:
稱取本品15.0g于1L蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝,121℃高壓**15分鐘,備用。
常用培養(yǎng)基及基本特性
1、RPMI-1640 Medium
RPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成**細(xì)胞、T細(xì)胞**瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。
2、Minimum Essential Medium(MEM)
也稱*低必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡(jiǎn)單,可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞類型,而其它沒有特殊之處的細(xì)胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。
3、DMEM-高糖(標(biāo)準(zhǔn)型)是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,Middlebrook 7H9 肉湯基礎(chǔ)可用于許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。
4、DMEM-低糖(標(biāo)準(zhǔn)型)是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),特別適用于生長(zhǎng)速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。
5、DMEM/F12
DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復(fù)雜,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結(jié)合,稱為DMEM/F12培養(yǎng)基(DME/F12medium),作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ),以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營(yíng)養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。Middlebrook 7H9 肉湯基礎(chǔ)為了增強(qiáng)該培養(yǎng)基的緩沖能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES緩沖液。
6、McCoy’s 5A
McCoy’s 5A Medium 主要為肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng)所設(shè)計(jì),可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長(zhǎng),除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些**細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞、人**細(xì)胞、HT-29、BHL-100等上皮細(xì)胞。
7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)
Guilber 和Iscove將Dulbecco’Medium 改良為 Iscove’s Medium,用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進(jìn)小鼠B**細(xì)胞,LPS刺激的B細(xì)胞,骨髓造血細(xì)胞,T細(xì)胞和**瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。IMDM為營(yíng)養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,因此可以用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng)。
8、M-199 Medium
1950年,Morgan成功研制出具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,即M-199,主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)。Middlebrook 7H9 肉湯基礎(chǔ)此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長(zhǎng)期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。
9、Leibovitz Medium (L-15)
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,氨基酸組成進(jìn)一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。
10、Ham’s F-10培養(yǎng)基:適應(yīng)小鼠細(xì)胞、人類二倍體的培養(yǎng)。
11、Ham’s F-12培養(yǎng)基:可以在加入很少血清的情況下應(yīng)用,特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),是無血清培養(yǎng)中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)液。
12、William’s Medium E:用于大鼠肝上皮細(xì)胞的長(zhǎng)期細(xì)胞培養(yǎng)。
13、MCDB 131 培養(yǎng)液:用于培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞。
14、Opti-MEM I Reduced Serum Media:用于培養(yǎng)造血細(xì)胞。
15、植物血凝素(PHA):增加細(xì)胞轉(zhuǎn)化和DNA合成。