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淺談IHC、ELISA與WB實(shí)驗(yàn)之間的區(qū)別
日期:2024-08-27 06:25
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摘要:
淺談IHC、ELISA與WB實(shí)驗(yàn)之間的區(qū)別
眾所周知,**組化IHC、蛋白質(zhì)印跡Western、酶聯(lián)**ELISA,**學(xué)三大工具,分別用于定位,定性和定量。
IHC(**組化Immunohistochemistry)
淺談IHC、ELISA與WB實(shí)驗(yàn)之間的區(qū)別是融合了**學(xué)原理(抗原抗體特異性結(jié)合)和組織學(xué)技術(shù)(組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等),通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色,來對(duì)組織(細(xì)胞)內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。樣本是細(xì)胞或組織,要在...
淺談IHC、ELISA與WB實(shí)驗(yàn)之間的區(qū)別
眾所周知,**組化IHC、蛋白質(zhì)印跡Western、酶聯(lián)**ELISA,**學(xué)三大工具,分別用于定位,定性和定量。
IHC(**組化Immunohistochemistry)
淺談IHC、ELISA與WB實(shí)驗(yàn)之間的區(qū)別是融合了**學(xué)原理(抗原抗體特異性結(jié)合)和組織學(xué)技術(shù)(組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等),通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色,來對(duì)組織(細(xì)胞)內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。樣本是細(xì)胞或組織,要在顯微鏡下觀察結(jié)果,可能出現(xiàn)膜陽性、質(zhì)陽性和核陽性。
ELISA(酶聯(lián)**吸附試驗(yàn)Enzyme linked immunosorbent assay)
淺談IHC、ELISA與WB實(shí)驗(yàn)之間的區(qū)別用到了**學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色,待測(cè)的樣品多是血清、血漿、尿液、細(xì)胞或組織培養(yǎng)上清液,因而沒有用到組織包埋、切片等技術(shù),這是與**組化的主要區(qū)別,操作上 開始需要將抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面,從而使后來形成的抗原-抗體-酶-底物復(fù)合物粘附在載體上,這就是“吸附”的含義。
WB (蛋白質(zhì)印跡Western Blot)
淺談IHC、ELISA與WB實(shí)驗(yàn)之間的區(qū)別先要進(jìn)行SDS-PAGE,然后將分離開的蛋白質(zhì)樣品用電轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)移到固相載體上,而后利用抗原-抗體-標(biāo)記物顯色來檢測(cè)樣品,可以用于定性和半定量。
對(duì)于IHC來說,定位是**組化*大的優(yōu)勢(shì)
該方法可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位,因而可同時(shí)對(duì)不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察,這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究,相比于其他蛋白檢測(cè)方法,**組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高,是定位檢測(cè)分析優(yōu)選方法對(duì)病理學(xué)領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義,尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。
WB與IHC技術(shù)相比,定量可能更加準(zhǔn)確
當(dāng)然WB也可定性和定位(通過提取膜蛋白或核蛋白、胞漿蛋白分別檢測(cè)其中抗原含量,進(jìn)而間接反映它們的定位),但敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于IHC。
ELISA與**組化技術(shù)相比,定量*準(zhǔn)確,是分泌性蛋白檢測(cè)優(yōu)選方法之一。
淺談IHC、ELISA與WB實(shí)驗(yàn)之間的區(qū)別尤其對(duì)于微定量分析多個(gè)樣本非常有用,所用試劑和樣品量很少,結(jié)果**。IHC針對(duì)性比較強(qiáng),而且一般是以組織或者細(xì)胞為樣本,而ELISA一般是使用血清或者組織磨碎液。**組化可以快速檢測(cè)樣本中抗體的陽性或者陰性,一般不用于定量檢測(cè)。
擁有專業(yè)的質(zhì)控團(tuán)隊(duì),配備先進(jìn)實(shí)驗(yàn)儀器,現(xiàn)已成功地建立了ChIP平臺(tái),因此我們的抗體不僅能提供Biotin、FITC、HRP等標(biāo)記,大部分抗體都能進(jìn)行ELISA、WB、IHC、IF、IP、ChIP等應(yīng)用驗(yàn)證。
Flarebio抗體平臺(tái)現(xiàn)已擁有4萬多種抗體(含單抗和多抗),包括人類常用抗體,模式生物類相關(guān)抗體、小分子抗體、二抗、標(biāo)簽抗體及內(nèi)參抗體等。并以每年4000種的速度在持續(xù)增長。
擁有專業(yè)的質(zhì)控團(tuán)隊(duì),配備先進(jìn)實(shí)驗(yàn)儀器,現(xiàn)已成功地建立了ChIP平臺(tái),因此我們的抗體不僅能提供Biotin、FITC、HRP等標(biāo)記,大部分抗體都能進(jìn)行ELISA、WB、IHC、IF、IP、ChIP等應(yīng)用驗(yàn)證。
我們致力于為所有用戶提供高親和力、高特異性的上等抗體。
代表產(chǎn)品:
單克隆抗體: 人TP53單抗、人BCL2L1單抗、人TGM2單抗、人CD81單抗、人CD59單抗、兔Timp1單抗、人IFNG單抗、人S100B單抗、人FABP3單抗等;
多克隆抗體: 兔抗狂犬病毒糖蛋白G多抗、兔抗雞卵粘蛋白多抗、兔抗鼠Plbd2多抗、兔抗人BGLAP多抗、兔抗人TIMP1多抗、兔抗人FCGRT多抗;
標(biāo)簽/內(nèi)參抗體: GAPDH 、6×His 、GFP、MYC、GST、MBP、Flag Tag 、Sumo Tag 等
小分子抗體: 皮質(zhì)醇單抗、膽酸單抗、克倫特羅單抗、磺胺甲惡唑單抗、皮質(zhì)酮單抗、鵝脫氧膽酸單抗、磺胺二甲嘧啶單抗、卡那霉素單抗、雌酮單抗等;
抗體對(duì): 人NGAL抗體對(duì)、人TNNI3抗體對(duì)、人FTL抗體對(duì)、人RBP4抗體對(duì)、人B2M抗體對(duì)、人IL8抗體對(duì)、人脂聯(lián)素抗體對(duì)、人TIMP1抗體對(duì)、大鼠TIMP1抗體對(duì)等 ;
ChIP Antibody: ACTL6A、AGO2、APEX1、CDH1、CTCF、ESR1、FOXP1、HDAC1、HDAC3、MCM3、NELFB、NFKB1、POLR3A、RELA、STAT5B、THOC1、TP53等。
Flarebio抗體平臺(tái)現(xiàn)已擁有4萬多種抗體(含單抗和多抗),包括人類常用抗體,模式生物類相關(guān)抗體、小分子抗體、二抗、標(biāo)簽抗體及內(nèi)參抗體等。并以每年4000種的速度在持續(xù)增長。