Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化))
細胞名稱:Hce-8693 人盲腸腺癌細胞(未分化)
組織來源:盲腸未分化腺癌;**結(jié)轉(zhuǎn)移
培養(yǎng)條件:RPMI-1640 +10% FBS
形 態(tài):貼壁;上皮細胞樣
背 景:Hce-8693源自一位男性盲腸未分化腺癌患者的**結(jié)轉(zhuǎn)移的病理切片。它的倍增時間是30.4小時,有絲分裂指數(shù)是28.8%。電子顯微鏡檢查呈現(xiàn)巨核,核仁分界明顯,微絲豐富,并有分泌顆粒。染色體模式數(shù)是48。在軟瓊脂上成克隆的比率是8%。細胞中和培養(yǎng)液上清中CEA陽性。當(dāng)異體移植到裸鼠時,Hce-8693細胞長成的瘤與患者原病灶一樣,在細胞質(zhì)中有阿爾新藍陽性物質(zhì)。
Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化))操作說明:
1)對于常溫運輸?shù)募毎?,收到細胞后,檢查是否有運輸問題,即細胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精**后,保留封口膜,放入細胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細胞培養(yǎng)體系,Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化))嚴格按照說明書的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運輸?shù)募毎埲〕隼鋬龉芎?,須立即放?/span>37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化))注意事項:
1)細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化))下面介紹幾種細胞培養(yǎng)過程中常見的污染:
一)桿菌污染:培養(yǎng)基中加入***可以減少此種污染,但也不是**的。
二)支原體污染:傳說中的黑焦蟲,長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數(shù)情況下是培養(yǎng)用血清。
三)***污染:似乎無處不在,而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細胞上,高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。
四)霉菌污染、比較常見的一種污染,常常來源于污染的空氣、水和器械。